Wyznaczenie pK_a wskaźnika błękitu bromofenolowego

Cel

Celem ćwiczenia jest wyznaczenie pK_a wskaźnika błękitu bromofenolowego.

Sprzęt i Odczynniki

• Spektrometr Spektra^TM

• Roztwór błękitu bromofenolowego

• Roztwór HCl 2 mol dm^-3

• Roztwór HCl 0,1 mol dm^-3

• Roztwór NaOH 2 mol dm^-3

• Roztwory buforowe pH 2-10,5
  

Zagrożenia

	NaOH jest substancją żrącą, powoduje oparzenia oczu i skóry, działa drażniąco na przewód pokarmowy. Unikaj kontaktu z oczami i skórą. Używaj farucha laboratoryjnego i okularów ochronnych. Zwroty ryzyka: 34 Zwroty bezpieczeństwa: 23, 24/25, 26,  36/37/39, 28
	Kwas solny jest substancją żrącą, drażniącą dla oczu, układu oddechowego i skóry. W przypadku kontaktu z oczami, przemyć obficie wodą i skonsultować się z lekarzem. Zwroty ryzyka: R 36/37/38 Zwroty bezpieczeństwa: S 26

Sposób postępowania

Przygotuj próbkę odniesienia odmierzając do zagłębienia w blistrze 300 µl wody dejonizowanej. Umieść po 150 µl roztworu błękitu bromofenolowego w kolejnych zagłębieniach blistra i dodaj po 150 µl roztworów buforowych o różnym pH. Zmierz transmitancję każdego roztworu względem próbki odniesienia używając diody emitującej niebieskie światło. Zapisz wyniki pomiarów i oblicz wartości absorbancji. Powtórz pomiary używając diody emitującej zielone, a następnie czerwone światło. Sporządź diagram zgodnie ze wskazówkami poniżej.

Wyniki

Wartość pH, przy której stężenia formy sprotonowanej i zdeprotonowanej są jednakowe, odpowiada pK_a. Wartość pK_a można wyznaczyć z krzywych otrzymanych dla diod emitujących niebieskie lub zielone światło, odczytując wartość pH dla której absorbancja spada o połowę. W tym przypadku wartość pK_a wynosi 4,0.

Opracowanie: Nataša Gros, Uniwersytet w Lublanie, Wydział Chemii i Technologii Chemicznej