Določitev pK_a indikatorja bromfenol modro

Cilj

Cilj aktivnosti je določiti pK_a indikatorja bromfenol modro.

Oprema in reagenti

• Spektrometer Spektra^TM
• Raztopina indikatorja bromfenol modro
• Raztopina HCl 2 mol/L
• Raztopina HCl 0,1 mol/L
• Raztopina NaOH 2 mol/L
• Pufri pH 2-10,5
• Prečiščena voda

Nevarnosti

	NaOH je koroziven, povzroča opekline oči in kože ter prebavil v primeru zaužitja. Izogibajte se stiku kemikalije s kožo in očmi, uporabljajte laboratorijska očala in haljo. Stavek R: 34 Stavek S: 23, 24/25, 26, 36/37/39, 28
	Klorovodikova kislina je korozivna; draži oči, dihalne poti in kožo. V primeru, da pride v stik z očmi, takoj izperite oči z veliko vode in pojdite k zdravniku. Stavek R: 36/37/38 Stavek S: 26

Postopek

Na blistru pripravimo serijo raztopin tako, da 150 µl raztopine indikatorja dodamo 150 µl raztopin z različnimi pH. Slepo pripravimo tako, da odmerimo 300 µl prečiščene vode. Transmitance izmerimo proti slepi pri modri LED, zapišemo rezultate in izračunamo absorbance. Postopek ponovimo za zeleno in rdečo LED. Narišemo graf, kot je prikazano spodaj.

Rezultati

pH, pri katerem je razmerje protonirane in neprotonirane oblike 1:1, ustreza vrednosti pK_a. Iz poteka krivulje posnete z modro (B-LED) ali zeleno LED (G-LED) lahko določimo pK_a tako, da poiščemo pH, ki ustreza znižanju absorbance na polovico. Rezultat za ta primer je pK_a 4,0.

Razvila in pripravila: Nataša Gros, Univerza v Ljubljani, Fakulteta za kemijo in kemijsko tehnologijo